MMAE-抗體偶聯，CellMosaic助力ADC研究！

間皮素（Mesothelin, MSLN）作爲一種腫瘤相關抗原，已在多種實體瘤中作爲治療靶點超過十年。間皮素抗體療法，包括免疫毒素、嵌合抗原受體T細胞（CAR-T）和抗體藥物偶聯物（ADC），已在臨床試驗中顯示出抗腫瘤活性。然而，這些療法仍存在一些挑戰，如需要高親和力抗體、提高抗原特異性、改善抗體對實體瘤的穿透性並減少抗體聚集。VH抗體結構域自2019年FDA批准首個VH抗體結構域caplacizumab以來，因其較小的尺寸和較低的免疫原性，被認爲在穿透實體瘤方面具有優勢。  

近期這一問題由Zehua Sun等人做出了新的研究突破，發表在《Molecular Therapy: Oncolytics》標題爲“Preclinical assessment of a novel human antibody VH domain targeting mesothelin as an antibody-drug conjugate”上。文章主要介紹了一種新的針對間皮素（mesothelin, MSLN）的人類抗體VH結構域3C9的發現和特性研究，以及其作爲抗體藥物偶聯物（antibody-drug conjugate, ADC）在臨床前模型中的評估。本研究旨在開發一種新型MSLN特異性VH抗體結構域，以解決現有療法的局限性。

研究方法

1.VH抗體結構域的篩選與表征：

• 研究團隊通過噬菌體展示技術，從一個人類VH結構域庫中篩選出了高親和力和特異性的MSLN特異性VH結構域3C9。

• 通過大小排阻色譜（SEC）、酶聯免疫吸附測定（ELISA）和表面等離子共振（SPR）等方法對3C9進行了詳細的表征，證實了其高親和力和特異性。

2.晶體結構解析：

• 確定了全長MSLN與3C9複合物的X射線晶體結構，揭示了3C9與MSLN表面兩個獨特殘基斑塊的相互作用。

3.ADC的制備與評估：

• 使用CellMosaic公司的偶聯試劑盒《貨號：CM11409》將單甲基澳瑞他汀E（MMAE）與VH-Fc 3C9偶聯，制備了ADC（VH-Fc 3C9-MMAE）。

• 通過ELISA、SEC分析和非還原SDS-PAGE等方法對ADC進行了表征。

4.細胞實驗：

• 在多種MSLN陽性和陰性細胞系上評估了VH-Fc 3C9-MMAE的細胞毒性。

• 使用流式細胞術分析了ADC對細胞周期和凋亡的影響。

5.動物實驗：

• 在BALB/c裸鼠皮下異種移植瘤模型中評估了VH-Fc 3C9的藥代動力學和腫瘤遞送。

• 評估了VH-Fc 3C9-MMAE在胰腺癌異種移植瘤模型中的體內抗腫瘤活性。

CellMosaic产品作用與價值

CellMosaic偶聯試劑盒，

Antibody MMAE Conjugation Kit (With VC-PAB Linkage)-貨號，CM11409

• 在本研究中，CellMosaic的偶聯試劑盒被用于將MMAE與VH-Fc 3C9偶聯，制備ADC。這一步驟是ADC制備中的關鍵環節，直接關系到ADC的穩定性和療效。

• CellMosaic的偶聯技術簡化了ADC的制備過程，提高了偶聯效率和穩定性，確保了ADC在後續實驗中的有效性。

價值體現：

• 提高制備效率：使用CellMosaic的偶聯試劑盒可以顯著縮短ADC的制備時間，降低操作複雜度，提高實驗室工作效率。

• 確保ADC質量：穩定的偶聯技術有助于減少ADC在制備過程中的降解和聚集，提高ADC的純度和穩定性，從而確保後續實驗結果的可靠性。

• 推動研究進程：高質量的ADC爲後續的細胞實驗和動物實驗提供了有力保障，加速了研究進程，有助于盡快評估ADC的抗腫瘤活性和安全性。

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結論

本研究成功篩選並表征了一種新型MSLN特異性VH抗體結構域3C9，該結構域具有高親和力和特異性，且能夠有效抑制MSLN陽性腫瘤的生長。通過晶體結構解析揭示了3C9與MSLN的相互作用機制，爲進一步優化抗體提供了結構基礎。此外，使用CellMosaic偶聯試劑盒成功制備了VH-Fc 3C9-MMAE ADC，並在細胞和動物實驗中展示了其抗腫瘤活性。這些結果表明，3C9作爲一種潛在的ADC候選藥物，具有進一步開發的價值。  

總結與展望

本研究不僅爲MSLN靶向療法提供了新的抗體候選物，還展示了CellMosaic偶聯試劑盒在ADC制備中的重要作用和價值。未來研究將進一步優化ADC的制備工藝和給藥方案，以期在臨床試驗中取得更好的療效和安全性結果。同時，基于3C9的結構信息，可以設計更多針對MSLN的多特異性抗體或CAR-T療法，以提高抗腫瘤效果並拓寬治療窗口。   

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