CellMosaic的Phenyldiazirine oxLink? (T2A10) 是CellMosaic?開發的一種專有的光交聯試劑,用于研究生物分子間的相互作用。
這種試劑將高效的卡賓生成基團苯基二氮丙啶與方便的肟可逆化學交聯以及超親水的AqueaTether? (AqT?) 鏈接器結合起來。這些結構特點使得與傳光交聯試劑相比,使用這種試劑具有高度的優勢。
三氟甲基苯基二氮丙啶(TFMP)基團:TFMP在360納米左右光解,此時對生物分子的光損傷最小。生成的卡賓在皮秒內在鄰近的生物分子夥伴中插入C-H鍵。由于電子吸引的三氟甲基基團使中間的重氮異構體穩定,因此在正常的標記條件下未檢測到任何副产品。
含有酮或醛基團的任何生物分子的化學交聯的氨基氧基團。氨基氧-酮連接在肽化學中是正交的,並將允許高度選擇性的基于固定相的交聯產物的分離。特別是,選擇性純化方法將允許在複雜基質中表征蛋白質複合物,如血漿、細胞膜和細胞裂解物,這些樣本可能含有自由硫醇,這些硫醇會幹擾標記和純化過程。圖1顯示了如何使用可逆的oxLink?來交聯相互作用的生物分子夥伴並鑒定交聯位點或檢測相互作用夥伴。
親水性AqT?鏈接器:TFMP基團高度疏水,使用傳統的乙烯和乙二醇型鏈接器標記的生物分子傾向于聚集並破壞標記的蛋白質的穩定性。T2A10 AqT?鏈接器由兩個蘇丁醇連接而成,大大增強了oxLink?的親水性(圖2)並提高了其水溶性(>27 mg/mL)。該分子還具有更少的非特異性疏水相互作用,允許高載荷的苯基二氮丙啶基團。
艾美捷CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink? (T2A10)化學信息:
化學品名稱:Phenyldiazirine sxLink? (T2A14)
化學式:不適用
分子量:633.66 Da
CAS編號:不適用
規格:
外觀:1.5毫升離心管中的白色凍幹粉末
儲存溫度:-20°C
純度:高效液相色譜法測定,純度≥ 95 %
产品應用:
標記含有醛或酮基團的生物分子
通過光交聯研究動態生物分子相互作用(例如,研究生物複合物和網絡、蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白質-DNA相互作用、小配體-蛋白質相互作用)
产品關鍵特性:
高度水溶性(>27 mg/mL)和生物相容性
高載荷量,最小化聚集
包含能夠形成可逆鏈接的正交肽化學交聯組
包含高效的卡賓生成光交聯組

圖1. 使用水溶性Phenyldiazirine oxLink? (T2A10)的oxLink?工作流程
圖2. 4-[3-(三氟甲基)-3H-二氮雜茚-3-基]苯甲酸(TFDB,紅色,在DMSO中)和oxLink?(藍色,在水中)的C18高效液相色譜分析。
CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink? (T2A10)文獻參考:
Protein crosslinking reviews: a) Brunner, J. (1993) Annu. Rev. Biochem. 62, 485?514. b) Freedman, R. B. (1979) Trends Biochem. Sci. 193–197. c) Herrmann, J. M., Westermann, B., Neupert, W. (2001) Methods Cell Biol. 65, 217–230. d) Fancy, D. A. (2000) Curr. Opin. Chem. Biol. 4, 28–32. e) Fasold, H., Klappenberger, J., Meyer, C., Remold, H. (1971) Angew. Chem. Internat. Edit. 10, 795–801. f) Bayley, H. Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology, Vol. 12. Elsevier, Amsterdam, Neth, 1983.
3-Trifluoromethyl-3-phenyldiazirine reference: Brunner, J., Senn, H. & Richards, F. M. (1980) J. Bio. Chem. 255, 3313?3318.
CellMosaic的生物偶聯物被用作研究工具、診斷試劑,以及藥物的新型載體,如抗體藥物偶聯物(ADCs)。艾美捷科技是CellMosaic的中國代理商,爲科研工作者提供優質的产品與服務。
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