“當蛋白-蛋白相互作用、翻譯後修飾與超高分辨率成像成為常規實驗時,決定成敗的往往不是儀器,而是那 50 uL 的填料。”
一、為什麽科研級樹脂需要“重新被定義”?
傳統瓊脂糖填料誕生於 1960 年代,其設計初衷是滿足毫克級純化;
而今天的科研場景更關註:
納克級富集——質譜前處理;
活細胞裂解液一次捕獲——避免稀釋丟失;
多標簽並行 Pull-down——系統生物學;
可逆、溫和的洗脫——保留復合物天然構象。
Nanotag 樹脂(Resins)系列以單域抗體(sdAb)為配基,將親和填料的性能邊界推向“微量、精準、模塊化”,為上述需求提供了系統級解決方案。
二、Nanotag 樹脂家族速覽
Cat. No. | 名稱 | 配基類型 | 場景關鍵詞 |
N0310 / N0315 | GFP Selector | 抗 GFP sdAb | 蛋白定位、CRISPR 報告基因 |
N0410 / N0415 | RFP Selector | 抗 RFP sdAb | 雙色成像富集 |
N0510 | TagFP Selector | 廣譜荧光蛋白 sdAb | 未知突變體篩選 |
N3210 | mNeonGreen Selector | 抗 mNeonGreen sdAb | 超分辨標記後回收 |
N0210 | GST Selector | 抗 GST sdAb | 經典 pull-down 升級 |
N0110 | MBP Selector | 抗 MBP sdAb | 膜蛋白增溶後復合物捕獲 |
N1510-N1517 | ALFA Selector 系列 | 抗 ALFA 標簽 sdAb | 通用標簽,可與 GFP 組合 |
N1810 | Ubiquitin K48 Selector | 抗 K48 鏈 sdAb | 蛋白酶體通路研究 |
N1910 | Ubiquitin K63 Selector | 抗 K63 鏈 sdAb | 信號轉導、自噬 |
N2510 | Ubiquitin pan Selector | 泛抗泛素 sdAb | 總泛素化組學 |
N0010-S / N0015-S | Selector Control | 無配基 | 背景扣除、陰性對照 |
三、技術核心:單域抗體配基帶來的三大差異
高密度固定
sdAb 僅 12–15 kDa,可在同一瓊脂糖微球表面實現 3–5 倍於傳統 IgG 的配基密度,從而帶來 uL 級樹脂即可完成 ng 級富集 的能力。
溫和洗脫
sdAb 與抗原結合界面以氫鍵/疏水作用為主,無多價 Fc 介導的強親和,因此可在 pH 6.0 或含 2 mM ALFA 競爭肽 條件下定量洗脫,復合物完整性顯著優於低 pH 甘氨酸法。
磁珠即用
N0315、N0415、N1515–N1517 提供磁珠版本,2 分鐘磁分離 即可完成裂解液預澄清、IP、洗滌三步,與 96 孔磁力板兼容,滿足自動化平臺需求。
四、場景化價值:讓樹脂成為實驗設計的“積木”
科研痛點 | Nanotag 樹脂切入方式 |
超分辨成像後,需回收荧光蛋白驗證互作 | 用 GFP Selector 磁珠 30 min 內捕獲 GFP-tagged 蛋白,洗脫後直接質譜 |
研究 K63 泛素鏈在自噬中的動態 | Ubiquitin K63 Selector 樹脂區分 K63 與 K48,避免抗體交叉反應 |
同時驗證多個荧光標簽的亞細胞定位 | ALFA Selector + GFP Selector 雙標簽並行 IP,節省樣品 |
膜蛋白復合物難以在非變性條件下富集 | MBP Selector 樹脂與 MBP 融合膜蛋白兼容 0.03 % DDM 條件 |
高通量 CRISPR 篩選後回收報告蛋白 | 96 孔磁珠版 GFP Selector 每孔僅需 5 uL 樹脂 |
五、與經典填料對比:性能而非體積
特征 | 傳統抗 GFP IgG-瓊脂糖 | Nanotag GFP Selector |
配基分子量 | ~150 kDa | ~15 kDa |
推薦樹脂體積 | 25–50 uL | 5–10 uL |
洗脫條件 | pH 2.7 甘氨酸 | pH 6.0 或 2 mM ALFA 肽 |
磁珠版本 | 罕見 | 標準 (N0315) |
批次重現性 | 動物血清差異大 | 大腸桿菌表達,序列固定 |
在“微量、原位、多維”成為基礎科研主旋律的當下,Nanotag 樹脂把傳統“純化工具”升級為“發現工具”。
當你只需要 5 uL 樹脂即可回收 GFP-tagged 轉錄因子;
當你用 30 min 完成 K63 泛素鏈富集並直接送去質譜;
當你在 96 孔板中並行驗證 48 種突變體的互作網絡——
你會意識到,實驗設計的瓶頸已經從“材料”轉向“想象力”。
Nanotag 樹脂,讓每一微升樣品都承載最大化的科學信息。
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