CellMosaic：PerKit SN38抗體偶聯試劑盒

癌症轉移是癌症致死的主要原因，然而當前的治療方法並未專門針對轉移性癌細胞。抗體基治療在癌症治療中展現出巨大潛力，通過精確靶向癌細胞表面的特異性表位，結合有效載荷或招募細胞毒性免疫細胞，提高癌症治療效果。例如，針對HER2的曲妥珠單抗顯著改善了HER2陽性乳腺癌患者的預後，並抑制了癌症複發。

Cadherin蛋白通過同型相互作用在細胞間形成黏附連接，對維持上皮結構至關重要。在癌症中，Cadherin蛋白經常失調，表現爲細胞遷移和侵襲性增加。上皮-間質轉化（EMT）伴隨E-Cadherin（CDH1）下調和N-Cadherin、OB-Cadherin（CDH11）等間質Cadherin上調。

Douglas等人制備上皮E-Cadherin（CDH1）和間質OB-Cadherin（CDH11）的雙特異性抗體23C6，發現它能有效克服腫瘤細胞的異質性，相關結果發表在PNAS上《Targeting breast and pancreatic cancer metastasis using a dual-cadherin antibody》

方法

1. 抗體生成與特性分析：

來源：23C6抗體源自針對CDH11細胞外結構域的雜交瘤。

序列分析：通過測序抗體可變區並建模潛在結合位點，發現兩個高度保守的結合位點，分別與CDH1和CDH11具有高親和力。

Western blot驗證：23C6抗體能特異性識別重組人CDH11、人及鼠CDH1蛋白。

2. 模型驗證與體內實驗：

小鼠模型：使用同基因小鼠乳腺癌模型（4T1細胞）和異種移植模型（MDA-MB-231和PDAC9細胞），通過腹腔注射23C6抗體進行治療。

療效評估：監測原發腫瘤生長、肺轉移負荷、循環腫瘤細胞（CTCs）數量及抗體毒性。

3. 毒性評估：

正常組織毒性：在免疫健全小鼠中評估23C6抗體對肾髒、肝髒、結腸等正常器官的影響。

組織學分析：通過HE染色和免疫組化評估組織損傷、細胞死亡和免疫細胞浸潤。

4. 抗體藥物偶聯物（ADC）制備：

偶聯方法：使用CellMosaic廠家的PerKit Antibody SN38 Conjugation Kit(Cat# CM11408x1)將23C6抗體與SN-38（伊立替康的活性代謝產物）偶聯。

效果評估：通過HPLC確認偶聯成功，並在PDAC9小鼠模型中評估ADC的抗腫瘤效果。

實驗

1. Cadherin表達異質性分析：

RNA-Seq數據：分析TCGA數據庫中不同癌症類型的Cadherin家族成員表達情況，發現上皮癌中CDH1高表達，而其他Cadherin成員表達存在異質性。

CTC分析：通過單細胞RNA-Seq分析轉移性乳腺癌患者的CTCs，發現CTCs中Cadherin表達具有高度異質性。

2. 23C6抗體對原發腫瘤和轉移的影響：

原發腫瘤生長：在4T1和MDA-MB-231模型中，23C6抗體治療對原發腫瘤生長無顯著影響。

肺轉移抑制：在切除原發腫瘤後，23C6抗體顯著減少4T1和MDA-MB-231模型中的肺轉移負荷。

CTCs減少：在PDAC9模型中，23C6抗體治療導致循環中CTCs數量顯著減少。

3. 毒性評估結果：

組織毒性：23C6抗體治療未導致小鼠正常器官的組織損傷、細胞死亡或免疫細胞浸潤增加。

體重與活動：抗體治療小鼠的體重、活動量和器官重量與對照組無顯著差異。

4. ADC的抗腫瘤效果：

細胞凋亡：在PDAC9模型中，23C6-SN38 ADC治療導致腫瘤細胞凋亡顯著增加，相比裸抗體和SN-38單體效果更佳。

結論

1. 23C6抗體的抗轉移效果：

有效性：23C6抗體通過靶向CTCs中的Cadherin蛋白，有效抑制乳腺癌和胰腺癌模型的血液傳播轉移，而不影響原發腫瘤生長或正常組織。

機制：抗體可能通過減少CTCs在血液循環中的存活和/或外滲來抑制轉移。

2. 安全性與耐受性：

無毒性：23C6抗體在正常小鼠中未表現出明顯毒性，表明其具有良好的安全性。

3. 臨床應用前景：

輔助治療：在圍手術期或寡轉移性疾病中，23C6抗體可能作爲輔助治療手段，減少手術或標准治療後的遠處轉移風險。

抗體藥物偶聯：23C6-ADC展示了增強的抗腫瘤效果，未來可進一步優化以提高治療效果和安全性。

4. 未來研究方向：

機制研究：深入探討23C6抗體在CTCs和早期轉移灶中的作用機制。

臨床應用：開展臨床試驗評估23C6抗體在不同癌症類型中的安全性和有效性。

Cell Mosaic的ADC偶聯試劑盒的作用與價值

推動抗體藥物偶聯技術：

增強療效：23C6-ADC展示了比裸抗體更強的抗腫瘤效果，爲抗體藥物偶聯技術的發展提供了新的範例。

未來潛力：通過進一步優化ADC的設計和制造，有望進一步提高治療效果和患者生存率。

綜上所述，Cell Mosaic品牌的PerKit Antibody SN38 Conjugation Kit(Cat# CM11408x1)，在癌症轉移治療中展現了巨大的潛力和價值。其精准靶向治療、良好的安全性和廣泛的適用性爲癌症患者帶來了新的治療希望，並有望推動個性化醫療和抗體藥物偶聯技術的發展。

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